雜交瘤技術(shù)的基本原理是什么?
雜交瘤技術(shù)的基本原理是檢驗(yàn)職稱考試需要掌握的內(nèi)容,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家搜集整理如下,希望可以幫助大家復(fù)習(xí)掌握。
雜交瘤技術(shù)的基本原理是通過融合兩種細(xì)胞而同時(shí)保持兩者的主要特征。這兩種細(xì)胞分別是經(jīng)抗原免疫的小鼠脾細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞。被特異性抗原免疫的小鼠脾細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)的主要特征是它的抗體分泌功能,但不能在體外連續(xù)培養(yǎng),小鼠骨髓瘤細(xì)胞則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖,即具有所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下,只有B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞才能具有持續(xù)培養(yǎng)的能力,形成同時(shí)具備抗體分泌功能和保持細(xì)胞永生性兩種特征的細(xì)胞克隆。
一、B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)
二、T細(xì)胞雜交瘤
三、陽性雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)
雜交瘤細(xì)胞形成后的初期很不穩(wěn)定,為確保單克隆抗體的專一性及避免其他陰性細(xì)胞對(duì)其生長影響,必須將陽性雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞分離培養(yǎng),產(chǎn)生單克隆雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)2~3次檢測(cè)均為陽性的雜交瘤單個(gè)細(xì)胞,才能進(jìn)行克隆化培養(yǎng)。
克隆化培養(yǎng)后的陽性雜交瘤細(xì)胞應(yīng)及時(shí)凍存,最好保存在-196℃液氮中。
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