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酶活力測(cè)定的影響因素是什么呢?

2020-04-20 18:24 來(lái)源:醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)
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酶活力測(cè)定的影響因素是什么呢?跟著小編來(lái)學(xué)習(xí)一下吧!

影響酶活性的因素包括底物的濃度、酶濃度、酶反應(yīng)的最適pH、最適溫度、酶的激活劑、抑制作用,另外還包括試劑中表面活性劑的作用等因素。

1.反應(yīng)速度:大多數(shù)酶促反應(yīng)是可逆反應(yīng),其速度既受底物濃度的影響,也受產(chǎn)物生成量的影響。酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)中所指速度是反應(yīng)的初速度。

當(dāng)?shù)孜餄舛容^高時(shí),在反應(yīng)的初期,其濃度變化甚微,產(chǎn)物生成量也很少,此時(shí)反應(yīng)速度可看作是恒定的。

2.底物濃度:

米氏方程是反映酶促反應(yīng)速度與底物濃度關(guān)系

[S]:底物濃度。

ν:不同[S]時(shí)的反應(yīng)速度。

νmax:最大反應(yīng)速度。

Km:米氏常數(shù)。

Km等于酶促反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度。

Km值是酶的特征常數(shù)之一,只與酶的性質(zhì)有關(guān),而與酶濃度無(wú)關(guān)。

不同的酶,Km值不同。同一個(gè)酶有幾種底物時(shí),則對(duì)每一種底物各有一特定的Km值,其中Km值最小的底物一般稱(chēng)為該酶的最適底物或天然底物。

3.測(cè)定酶活力時(shí)需注意

(1)酶促反應(yīng)過(guò)程中,要用初速度表示酶促反應(yīng)速度。

(2)要規(guī)定時(shí)間、溫度、pH等反應(yīng)條件,并在酶測(cè)定過(guò)程中保持這些反應(yīng)條件的恒定。

(3)配制的底物濃度應(yīng)準(zhǔn)確且足夠大,底物液中應(yīng)加入不抑制該酶活力的防腐劑并保存于冰箱中,以防止底物被分解。

(4)標(biāo)本要新鮮,應(yīng)保存于冰箱中。用血漿時(shí),應(yīng)考慮到抗凝劑對(duì)酶反應(yīng)的影響。在采血、分離血清時(shí),應(yīng)注意防止溶血和白細(xì)胞的破裂。

(5)在測(cè)定過(guò)程中,所用儀器應(yīng)絕對(duì)清潔,不應(yīng)含有酶的抑制物,如酸、堿及蛋白沉淀劑等。

以上是醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家整理的內(nèi)容,希望對(duì)大家有所幫助,更多關(guān)于臨床檢驗(yàn)技師的資訊請(qǐng)大家繼續(xù)關(guān)注醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)! 

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