影響酶作用的因素有哪些?
備考很痛苦,等考試完回頭看的時候你會感覺很幸福!運氣,就是機會碰巧撞到了你的努力,所以努力吧考生!關(guān)于檢驗職稱的考試,相信很多朋友都想知道“酶作用”的相關(guān)知識,為此醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家整理了“影響酶作用因素”的相關(guān)內(nèi)容,希望對大家有所幫助,祝大家考試順利,取得好成績!
影響酶作用的因素包括底物的濃度、酶反應(yīng)的最適pH、最適溫度、酶的抑制作用,另外還包括試劑中表面活性劑的作用等因素。
1.底物濃度的影響
在檢測試劑中底物濃度、輔因子、活化劑、復(fù)構(gòu)劑的種類和濃度均對酶的測定至關(guān)重要。
其中以底物的種類和濃度最為重要。
底物濃度影響遵循米氏方程:ν=V[S]/Km+[S]
當(dāng)?shù)孜餄舛冗h遠小于K m ,增加底物濃度,反應(yīng)速度增加。
當(dāng)?shù)孜颷S]>>Km 時,公式近似為ν=V,反應(yīng)速度不再增加,故此時反應(yīng)速度為最大反應(yīng)V。
從理論上說只有測定的是酶最大反應(yīng)V,反應(yīng)速度才和酶量成正比。
(1)底物的種類
若所測的酶專一性不強,可作用于多種底物,Km 最小的底物往往是此酶的生理底物。 (Km表示酶和底物的親和力,Km越小親和力越大)
如該酶測定主要用于臨床診斷工作,首先應(yīng)考慮有效診斷價值的底物。
選擇Km小的底物測定酶活性,在最大反應(yīng)速度時底物濃度也將最低。這意味著試劑成本可能較低,不易出現(xiàn)底物難溶解的困難。
(2)選擇底物的合適濃度
確定底物種類后,重要的是選擇底物的合適濃度。
米氏方程在選擇酶測定底物濃度有著重要的指導(dǎo)作用。
計算出某一酶的Km后就可以計算出不同底物濃度和Km間的比值,將其代入米氏方程就可以計算出此時酶促反應(yīng)速度相當(dāng)于最大反應(yīng)速度的百分比。
上述只能適應(yīng)用于單一底物的酶。
2.反應(yīng)體系的最適pH、緩沖液的種類和濃度
測定酶活性濃度時一定要選擇在最適pH。
因為此處酶反應(yīng)速度最大,測定靈敏度最高。此處酶活性變化的斜率最小,如反應(yīng)體系中出現(xiàn)pH變化時,對測定結(jié)果影響最小。
pH還可以影響酶的穩(wěn)定性。
為使反應(yīng)體系能穩(wěn)定在最適pH范圍,實際檢測時多采用不同類型、不同濃度的緩沖液。
3.溫度的控制
溫度對酶活性影響具有雙重性。
化學(xué)速度隨溫度升高而加快,酶反應(yīng)也不例外。
Q10值即溫度增加10℃,化學(xué)速度的變化率。酶的Q10值約在1.5~2.5。(溫度每增加10℃,酶促反應(yīng)速度增加1~2倍左右。)
當(dāng)溫度超過一定范圍,反應(yīng)速度下降,(酶蛋白變性)應(yīng)選最適反應(yīng)溫度。
37℃是目前使用最廣泛的測定酶催化活性濃度的溫度。
以上內(nèi)容是由醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家編輯整理得“影響酶作用因素”的相關(guān)知識,還請大家多多關(guān)注醫(yī)學(xué)教育網(wǎng),會有更多更好的關(guān)于各類醫(yī)學(xué)考試的信息等著大家。今日事今日畢,今日也要努把力!
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